人前列腺癌細胞 （LNCaP）

人前列腺癌細胞 (LNCaP)
細胞介紹：
人前列腺癌細胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴 結針刺活檢中分離，該患者經確診爲前列腺癌轉移。這株細胞對5-ct-二氫睾酮(生長調節子和酸性磷酸脂酶産物)有響應。這株細胞並(bìng)不形成*的單層(céng)，而是形 成集落，在傳代時可以用滴管反複吹吸打碎。它們僅僅輕輕地吸附在基底上，不 形成彙合
，很快使培養基變(biàn)酸。生長(zhǎng)很慢，傳代後48小時内不應擾動。當培養 瓶封包後，多數細胞從(cóng)培養瓶底分離，懸浮在培養基中。收到後，在通常培養單 層(céng)細胞的條件下培養24到48小時，以使細胞再貼壁。此後(hòu)可以換(huàn)上新鮮培養液。如果需要，培養瓶内容物可以收集，300g離心15分鍾，以10毫升培養液重懸 並(bìng)培養到一個單(dān)獨的培養瓶中。請使用Coming的Cellbind培養瓶培養。

 
細胞培養步驟：
1)培養基及培養凍存條件準備：
1.準備 RPIVM-1640 培養基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC03 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸鈉O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。

2. 培養條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度
：37攝氏度，培養箱濕度爲70%-80%。
3.凍存液：90%*培養基，10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
 
2)細胞處理
：
複蘇細胞：将含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補(bǔ)加l-2mL培養基後吹勻。然後将所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或将 細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液並(bìng)檢查細胞密度。

細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
 
人前列腺癌細胞 (LNCaP)對於貼壁細胞，傳代可參考以下方法
：
棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)於培養瓶中，置於37°C培養箱中消化1-2分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變(biàn)圓並(bìng)脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化。按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養基，輕輕打勻後(hòu)吸出，在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補(bǔ)加l-2mL培養液後(hòu)吹勻。将細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者 瓶中。

 
細胞凍存：待細胞生長狀态良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基後加入少量胰酶，細胞變圓脫落後，加入約lml含血清的培養基後(hòu)加入凍(dòng)存管中，再添加1〇%DMSO後(hòu)進行凍(dòng)存。

 
注意事項：
收到細胞後，若發現幹冰己揮發幹淨、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們電聯。
所有動物細胞均視爲有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全台内操作，並請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丢棄。

 
細胞特性：
1)來源：前列腺；左鎖骨淋巴結癌轉移竈
2)形态：上皮細胞樣
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測爲陰性
5)規格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
 
人前列腺癌細胞 (LNCaP)運輸和保存：可選擇幹冰運輸及發送複蘇存活細胞方式：（1)幹冰運輸，收到後立即轉入液氮凍存或直接複蘇；（2)存活細胞，收到後應繼續生長(zhǎng)，傳(chuán)代達到細胞生長(zhǎng)狀态良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

細胞用途：僅供使用。